Evaluación del efecto del cloruro de calcio y gluconato de calcio en la activación de plaquetas humanas

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dc.contributor.advisorBecerra Bayona, Silvia Milena
dc.contributor.advisorSolarte David, Victor Alfonso
dc.contributor.apolounabBecerra Bayona, Silvia Milena [silvia-milena-becerra-bayona]
dc.contributor.authorHinojosa Galindo, Andrés Felipe
dc.contributor.authorGóngora Orozco, Laura Isabel
dc.contributor.authorGutiérrez Arenis, Carlos Sleider
dc.contributor.cvlacBecerra Bayona, Silvia Milena [0001568861]spa
dc.contributor.cvlacSolarte David, Víctor Alfonso [0001329391]spa
dc.contributor.googlescholarBecerra Bayona, Silvia Milena [5wr21EQAAAAJ&hl=es&oi=ao]spa
dc.contributor.linkedinBecerra Bayona, Silvia Milena [silvia-becerra-3174455a]
dc.contributor.orcidBecerra Bayona, Silvia Milena [0000-0002-4499-5885]spa
dc.contributor.orcidSolarte David, Víctor Alfonso [0000-0002-9856-1484]spa
dc.contributor.researchgateBecerra Bayona, Silvia Milena [Silvia-Becerra-Bayona]spa
dc.contributor.researchgroupGrupo de Estudio Genético de Enfermedades Complejasspa
dc.contributor.researchgroupGrupo de Investigaciones Clínicasspa
dc.coverage.campusUNAB Campus Bucaramangaspa
dc.coverage.spatialFloridablanca, Santander (Colombia)spa
dc.coverage.temporalJunio 2021-octubre 2021spa
dc.date.accessioned2022-03-02T16:20:51Z
dc.date.available2022-03-02T16:20:51Z
dc.date.issued2022-01-25
dc.degree.nameIngeniero Biomédicospa
dc.description.abstractLa activación plaquetaria es un procedimiento de gran frecuencia en el área de la medicina regenerativa. A pesar de contar con diversos protocolos para la activación plaquetaria, los procesos carecen de una estandarización adecuada donde se logre obtener concentraciones y una cinética de liberación de factores de crecimiento (FC) similares. Por lo tanto, existe la necesidad de evaluar diferentes alternativas que lleven a una activación plaquetaria óptima al implementar diferentes métodos, como es el uso de agentes activadores derivados del calcio que logran una gran capacidad de estimulación durante la activación de plaquetas humanas. En este estudio se realizó la activación de plaquetas bajo diferentes condiciones; en específico, resuspendidas en Plasma pobre en plaquetas (PPP) y tapón fosfato salino (PBS) con el uso de cloruro de calcio ('CaCl2') y gluconato de calcio a concentraciones de 10, 20 y 40 mM en periodos de tiempo de 0, 5, 10, 15, 20, 30 minutos y 24 horas. La activación plaquetaria inducida por estos dos agentes se evaluó por medio de citometría de flujo estudiando marcadores de superficie, mientras que la liberación de FC se determinó por medio espectrofotometría para la identificación de proteínas totales (PT). Los resultados obtenidos de la activación plaquetaria demostraron que las muestras resuspendidas en PBS presentaron mejores porcentajes de activación que las resuspendidas en PPP; de igual manera, las muestras activadas con gluconato de calcio presentaron porcentajes de activación plaquetaria mayores en comparación al 'CaCl2'. En cuanto a la liberación de FC, se observó que en el grupo de muestras resuspendidas en PPP el gluconato de calcio alcanzó una mayor liberación que el 'CaCl2' en cada uno de los periodos de tiempo, siendo la concentración de 40 mM la que llevó a la mayor liberación. Esto permite concluir que el gluconato de calcio llega a tener un mejor potencial en la activación de plaquetas humanas que el 'CaCl2'.spa
dc.description.abstractenglishPlatelet activation is a frequent procedure in the area of regenerative medicine. Despite having a variety of protocols for platelet activation, these processes lack of adequate standardization where similar concentrations and release kinetics of growth factors (GF) can be obtained. Therefore, there is a need to evaluate different alternatives that lead to optimal platelet activation by implementing different methods, such as the use of activating agents derived from calcium. In this study, platelet activation was performed under different conditions; specifically, resuspending the platelet pellet in Platelet-poor plasma (PPP) and phosphate buffered saline (PBS) with the use of calcium chloride ('CaCl2') and calcium gluconate at concentrations of 10, 20 and 40 mM in time periods of 0, 5, 10, 15, 20, 30 minutes and 24 hours. Platelet activation induced by these two agents was evaluated by flow cytometry studying surface platelet markers, while the FC release was determined by spectrophotometry for the identification of total proteins (PT). Results obtained from platelet activation revealed that samples resuspended in PBS showed better activation percentages than those resuspended in PPP; Similarly, the samples activated with calcium gluconate presented higher percentages of platelet activation compared to 'CaCl2'. Regarding the release of FC, it was observed that in the group of samples resuspended in PPP, and activated by calcium gluconate reached a greater release than 'CaCl2' in each of the time periods, being the concentration of 40 mM the one that led to the highest release. This allows us to conclude that calcium gluconate reaches to have a better potential in activating human platelets than 'Cal2'.spa
dc.description.degreelevelPregradospa
dc.description.learningmodalityModalidad Presencialspa
dc.description.tableofcontentsCapítulo 1 Problema u Oportunidad ............................................................................................9 Introducción ....................................................................................................................9 Planteamiento del Problema...........................................................................................10 Justificación ..................................................................................................................11 Pregunta Problema.........................................................................................................12 Objetivo General ...........................................................................................................12 Objetivos Específicos ....................................................................................................12 Capítulo 2 Marco Teórico .........................................................................................................13 Las Plaquetas.................................................................................................................13 Definición y Función .........................................................................................13 Estructura de las Plaquetas.................................................................................13 La Activación Plaquetaria ..................................................................................14 Plasma Rico en Plaquetas ..............................................................................................16 Definición..........................................................................................................16 Preparación del PRP...........................................................................................16 Factores de Crecimiento.....................................................................................18 Capítulo 3 Estado del Arte ........................................................................................................21 Capítulo 4 Metodología.............................................................................................................24 Preparación del Plasma Rico en Plaquetas (PRP)...........................................................24 Activación Plaquetaria...................................................................................................24 Análisis del grado de activación plaquetaria...................................................................25 Cuantificación de los FC................................................................................................26 Análisis Estadístico .......................................................................................................26 Capítulo 5 Resultados y Análisis de Resultados.........................................................................28 Resultados.....................................................................................................................28 Preparación del PRP...........................................................................................28 Activación Plaquetaria .......................................................................................29 Cuantificación de Factores de Crecimiento.........................................................49 Análisis de Resultados...................................................................................................58 Capítulo 6 Conclusiones y Recomendaciones............................................................................63 Referencias ...............................................................................................................................65 Apéndice...................................................................................................................................70spa
dc.format.mimetypeapplication/pdfspa
dc.identifier.instnameinstname:Universidad Autónoma de Bucaramanga - UNABspa
dc.identifier.reponamereponame:Repositorio Institucional UNABspa
dc.identifier.repourlrepourl:https://repository.unab.edu.cospa
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/20.500.12749/15767
dc.language.isospaspa
dc.publisher.facultyFacultad Ingenieríaspa
dc.publisher.grantorUniversidad Autónoma de Bucaramanga UNABspa
dc.publisher.programPregrado Ingeniería Biomédicaspa
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dc.rights.accessrightsinfo:eu-repo/semantics/openAccessspa
dc.rights.creativecommonsAtribución-NoComercial-SinDerivadas 2.5 Colombia*
dc.rights.localAbierto (Texto Completo)spa
dc.rights.urihttp://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/2.5/co/*
dc.subject.keywordsAgonistspa
dc.subject.keywordsPlatelet activationspa
dc.subject.keywordsFlow cytometryspa
dc.subject.keywordsGrowth factorsspa
dc.subject.keywordsCalcium chloridespa
dc.subject.keywordsBlood cellsspa
dc.subject.keywordsPlatelet aggregationspa
dc.subject.lembIngeniería biomédicaspa
dc.subject.lembBioingenieríaspa
dc.subject.lembMedicina regenerativaspa
dc.subject.lembCloruro de calciospa
dc.subject.lembCélulas sanguíneasspa
dc.subject.lembAgregación plaquetariaspa
dc.subject.proposalActivación plaquetariaspa
dc.subject.proposalAgentes activadoresspa
dc.subject.proposalFactores de crecimientospa
dc.subject.proposalCitometría de flujospa
dc.titleEvaluación del efecto del cloruro de calcio y gluconato de calcio en la activación de plaquetas humanasspa
dc.title.translatedEvaluation of the effect of calcium chloride and calcium gluconate on human platelete activationspa
dc.type.coarhttp://purl.org/coar/resource_type/c_7a1f
dc.type.driverinfo:eu-repo/semantics/bachelorThesis
dc.type.hasversioninfo:eu-repo/semantics/acceptedVersion
dc.type.localTrabajo de Gradospa
dc.type.redcolhttp://purl.org/redcol/resource_type/TP

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